專注外泌體研究，外泌體提取專家，專注外泌體提取試劑盒

一、外泌體提取試劑盒：

外泌體（Exosome）是由細胞分泌的包含RNA和蛋白質的小囊泡（30-150 nm），在血液、唾液、尿液及乳汁等體液中大量存在。外泌體被認為具有細胞間信使的功能，在特定細胞之間傳遞它們的效應物或信號分子；然而其構造、效應物組成以及所參與的生物學通路目前尚不明晰。

外泌體的生物學功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒，而傳統超速離心方法步驟繁瑣、硬件要求高、操作難度大。由本公司自主開發的外泌體快速提取試劑，組分經過優化處理，適用于細胞培養上清液中的外泌體提取，可快速高效地獲得外泌體顆粒，可用于電鏡分析、NTA粒徑分析、核酸分析、蛋白分析、細胞學實驗和動物實驗等。

外泌體提取的不同方法：

沉淀法：

柱純法：

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二、高純度外泌體：

隨著應用型客戶對于外泌體純度要求的提高，本公司開發了大規模外泌體分離純化工藝，通過數十項質量控制和質量檢查，形成了高純度外泌體產品，直徑在30~200nm，可作為科研試劑用于透射電鏡分析、NTA粒徑分析、核酸蛋白分析、細胞學及動物學實驗等。包括293T外泌體，牛奶外泌體，干細胞外泌體，植物外泌體，以及定制化工程外泌體等等。

a)     293T外泌體是293T無血清培養細胞上清液中分離提取獲得的高純度外泌體顆粒。

b)     牛奶外泌體是從新鮮的牛奶中分離提純獲得，富含與細胞膜相同的磷脂雙分子層薄膜結構，緊密包裹細胞因子、生長因子等特異蛋白質、脂質、miRNADNA片段，可迅速打通細胞生物膜輸屏障精準識別、定位細胞損傷等。

c)      MSC細胞外泌體是無血清培養人臍帶間充質干細胞上清液中分離提取獲得的高純度外泌體顆粒。

d)     植物外泌體(姜黃)是姜黃汁液清液中分離提取獲得的高純度外泌體顆粒。

e)     植物外泌體(葡萄)是葡萄汁液清液中分離提取獲得的高純度外泌體顆粒。

產品質控：

                                                   細胞外泌體生產工藝流程圖                                                   牛奶外泌體生產工藝流程圖

外泌體電鏡圖

外泌體NTA檢測圖

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三、外泌體獲取：

a)   去外泌體胎牛血清由無菌采集的健康胎牛血清過濾而成，去除≥99%的胎牛血清內源外泌體，并與處理前的胎牛血清具相同的細胞生長速率和形態。

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b)    外泌體專用培養基是一款專門用于外泌體的培養基。產品含有HEPES，L-Glutamine, Pharm Grade Albumin, Hypoxanthine, Thymidine, Phenol Red, Glucose. 無動物源Xeno-free, Serum-free.不含生長因子（Growth factors），細胞培養過程中無需添加血清即可達到完全培養基的培養狀態，有利于外泌體的收獲。

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c)     外泌體專用間充質干細胞培養基（Mesenchymal Stem Cell, MSC）培養基及添加劑是一套適用于MSC細胞的無血清、化學成分限定的培養基，專門用于該類細胞外泌體的制備與生產。細胞培養過程中無需添加血清或血小板裂解物，減少外源顆粒的干擾，促進MSC細胞分泌外泌體。

d)    外泌體專用293無血清培養基是適用于HEK293 細胞培養的無血清、化學成分限定的培養基，專門用于HEK293細胞外泌體的研發與生產。細胞培養過程中無需添加血清，與配套補料搭配使用能夠促進 293 細胞大量分泌外泌體，較常規 HEK293細胞培養基可提高產量5~10 倍。

產品質控：

e)   外泌體專用293無血清培養基補料與外泌體專用293無血清培養基配合使用，能夠提高HEK293細胞活率與密度，提高外泌體分泌量。

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四、外泌體研究常用試劑：

a)     DiR是一種親脂性的近紅外熒光花青染料。其兩個18-碳鏈可以與細胞膜或親脂性生物分子結合，從而進行特定、穩定的染色。DiR所發射的紅外光可以高效地穿過細胞和組織，所以常用于活體成像和示蹤。

b)     PKH26外泌體紅色熒光標記染料能將帶有較長脂質尾巴的黃色-橙色熒光染料（PKH26）結合到細胞膜脂質區域上，是一種親脂性的紅色熒光膜染料。能增加染色效率，同時維持細胞活力，可用于外泌體的標記染色實驗，監測細胞示蹤。

c)      PKH67外泌體綠色熒光標記染料能結合到細胞膜脂質區域上，是一種親脂性的綠色熒光膜染料。能增加染色效率，同時維持細胞活力，可用于外泌體的標記染色實驗，監測細胞示蹤。

d)     Acoerela 的 Aco-600屬于水溶性、跨膜的共軛寡電解質（COEs）。這類親脂性染料具備獨特性能，能夠完全嵌入目標膜的脂質雙層，從根源上最大程度減少染料從目標中“泄漏”的情況發生。 在熒光特性方面，Aco-600 只有在與目標膜結合時， 才會呈現出顯著的熒光增強效果。同時，Aco-600 具有極高的水溶性，溶解在水性緩沖液時，既不會形成膠束，也不會產生納米顆粒。這一特性使其在納米流式分析以及細胞攝取實驗中，能夠有效規避假陽性結果的出現，確保實驗數據的準確性與可靠性。

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