Anti His Antibody-HRP抗體

產品介紹 

His 標簽肽段一般是由6個或者8個組氨酸組成，它可以連接在融合蛋白的N端或者C端，其分子量較小，并且較容易分離和純化，是目前標 簽系統中使用最為廣泛的一種。抗His標簽的抗體能對His標簽融合蛋白進行準確的檢測和純化，通過一定的工藝將辣根過氧化物酶(HRP) 偶聯至His標簽抗體上，進行WB實驗時加入發光液A和B，一般是魯米諾和過氧化氫，在辣根過氧化物酶(HRP)的催化作用下，魯米諾與過 氧化氫反應生成一種過氧化物，過氧化物不穩定隨即分解，形成一種能發光的電子激發中間體，當后者由激發態返回至基態，就會產生熒光， 實現對His標簽融合蛋白的快速檢測。

基本信息 

抗體來源：重組抗體 

交叉反應：His標簽融合蛋白 

克隆類型：單克隆抗體 

偶聯物：辣根過氧化物酶(HRP) 

純化方式：rProtein A親和純化 

儲存緩沖液：1×PBS (pH7.4) ，0.05% proclin300，50%甘油 

產品應用 

WB=1:30000-1:100000 

ELISA=1:5000-1:10000

注意事項 

1)本產品為HRP直標抗體，需要避光保存于-20℃或者-80℃中； 

2)本產品靈敏度高，WB稀釋比值請按照說明書進行，否則可能會出現非特異性條帶； 

3) NC膜或者PVDF膜在轉膜前需要用甲醇激活，轉膜后抗體稀釋液盡量過量，轉膜和抗體孵育過程中不要產生氣泡； 

4)本品在37℃下孵育30min-60min即可產生很明顯的信號，常溫孵育可適當延長時間。

參考信息 

1) 表達系統：293細胞分泌表達; 

2) 蛋白信息：帶有His標簽的重組蛋白，大小≈42KDa； 

3) 上樣順序：1為約含有10ng目的蛋白的培養基原樣，2為10ng純化后的目的蛋白，3為牛血清白蛋白(BSA)； 

4) 抗體稀釋液體積：10ml； 

5) 抗體孵育條件：37℃搖晃孵育30min; 

6) 顯色：ECL進行顯色; 

7) 結論：Anti His Antibody-HRP 按照 1:10000，1:30000 和1:100000稀釋后（抗體稀釋體積10ml）37℃搖晃孵育30min，能夠看到很 明顯的信號，目的條帶位置在42KDa，隨著稀釋比值的增大，信號值會有下降，我們推薦客戶使用1:30000的梯度進行抗體稀釋。

儲存條件

干冰運輸，-20℃可保存2年，避免反復凍融。