Bialaphos 雙丙氨膦

產品簡介：

Bialaphos，中文名雙丙氨膦，是由鏈霉菌Streptomyces hydroscopius或Streptomyces viridochromeogenes代謝產生的一種天然有機膦三肽抗生素，由兩個丙氨酸殘基和谷氨酸類似物草銨膦（phosphinothricin，也稱為glufosinate）組成。Bialaphos可以用于許多植物物種的轉化實驗，篩選含有抗性基因（bar）的基因工程細胞系。Bialaphos在玉米培養中比草銨膦的活性強；在小麥培養中，雙丙氨膦是用來篩選含有bar基因植物最可靠的選擇標準。作為一種廣譜除草劑，Bialaphos還對革蘭氏陰性和陽性菌以及一些真菌類植物病原體具有抑菌作用。

Biolaphos的選擇機制在于：對于正常（無相關抗性）細胞，一旦進入細胞后，雙丙氨膦被水解轉化為草銨膦（phosphinothricin），后者對植物細胞具有毒性。因其可抑制谷氨酰胺合成酶活性，引起細胞內氨的積累，破壞細胞的初級代謝從而殺傷細胞。來自Streptomyces hygroscopicus的bar基因，以及來自Streptomyces viridochromeogenes的pat基因都能夠編碼草銨膦乙酰轉移酶（phosphinothricin acetyltransferase (pat) enzyme），后者通過乙酰化草銨膦從而解除該化合物的毒性，因此使細胞對雙丙氨磷以及草銨膦產生抗性。

產品特性：

1）CAS NO.：71048-99-2

2）英文別名：Bialaphos

3）中文名稱：雙丙氨膦

4）分子式：C11H21N3O6P·Na

5）分子量：345.26 g/mol

6）外觀：白或淺棕色結晶性粉末

7）純度：≥85%

8）溶解性：溶于水（10 mg/mL）

9）化學結構圖：

保存條件: 

-20℃保存，有效期2年。母液-20℃分裝保存，有效期1年。

應用案例【轉基因的小麥幼胚/愈傷組織篩選】（僅作參考）：

1. 使用草銨膦（PPT）或雙丙氨膦進行轉化細胞的篩選；

2. 粒子轟擊（bombardment）后將未成熟幼胚逐個轉移到E3培養基，維持培養7-14天；

3. 胚胎轉移到含5μg/ml PPT（或雙丙氨膦）的MSCB5培養基（第一輪篩選用培養基），黑暗培養2周；于這2周內不能正常生長的愈傷組織直接扔棄。

4. 用解剖刀將在MSCB5培養基上增殖的細胞簇解離，亞克隆，轉移到含有10 μg/ml PPT（或雙丙氨膦）的MSCB10培養基，維持培養4周。

5. 在含5μg/ml或10μg/ml PPT（或雙丙氨膦）的培養基上篩選過程的持續周期約為50-75天。將所有培養物放到植物生長培養箱內，設置25 °C，黑暗培養。每一個轉基因愈傷組織在含有篩選標志的培養基上最終生長為大量的胚性愈傷組織。

6. 設置1-10μg/ml PPT（或雙丙氨膦）的梯度濃度來測試未轉化愈傷組織，以建立更加有效的篩選系統。每一次實驗大概準備20個目標培養平板。2個為對照，1個在N6C1上生長以監測培養物的健康情況，另1個在含5-10μg/ml雙丙氨膦的N6C1上生長以驗證未轉化細胞對選擇標志的反應。

【注意】：轉基因小麥愈傷組織的選擇實驗中雙丙氨膦是有效的篩選標志，然而雙丙氨膦不能殺死未轉化細胞。為了得到理想的篩選效果，建議低密度（大概每個平板上10個未成熟幼胚）亞培養粒子轟擊后的細胞。

注意事項：

1.      為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

本產品僅用于生命科學研究，不得用于醫學診斷及其他用途！