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<BK0022> ACE 磁珠法質(zhì)粒DNA小量提取試劑盒(預分裝)

欄目:核酸提取純化
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磁珠法質(zhì)粒DNA抽提試劑盒采用經(jīng)典的SDS堿裂解法充分裂解釋放質(zhì)粒,再通過醇介導將質(zhì)粒結合于納米磁珠表面,經(jīng)洗雜液洗去蛋白等雜質(zhì),最后洗脫得到高純的質(zhì)粒產(chǎn)物。產(chǎn)物可用于酶切、轉(zhuǎn)化、PCR、測序等分子生物學實驗。


磁珠法質(zhì)粒DNA小量提取試劑盒(預分裝)

產(chǎn)品線

產(chǎn)品目錄名稱

規(guī)格

貨號

目錄價

核酸提取純化

磁珠法質(zhì)粒DNA小量提取試劑盒(預分裝)

64T

BK0022-01

160


產(chǎn)品介紹

磁珠法質(zhì)粒DNA抽提試劑盒采用經(jīng)典的SDS堿裂解法充分裂解釋放質(zhì)粒,再通過醇介導將質(zhì)粒結合于納米磁珠表面,經(jīng)洗雜液洗去蛋白等雜質(zhì), 最后洗脫得到高純的質(zhì)粒產(chǎn)物。產(chǎn)物可用于酶切、轉(zhuǎn)化、PCR、測序等分子生物學實驗。

試劑名稱

64 T

溶液 P1

7 ml

溶液 P2

7 ml

溶液 P3

7 ml

RNase (20 mg/ml)

700 μl

MagET? 質(zhì)粒DNA預分裝試劑板

1*4

MagET? 8孔磁棒套

4*2


注意事項 

1 使用前檢查各組分是否出現(xiàn)沉淀。若有,請輕輕搖晃混合均勻,或37℃水浴重新溶解。 

2 使用前請將 RNase(20mg/ml) 全部加入溶液 P1中,用完置于4℃保存。


使用流程 

樣本預處理 

1 取1-5ml 細菌培養(yǎng)物,加入離心管中,使用常規(guī)臺式離心機12,000rpm(~13,400×g)離心1-5 min ,盡量吸盡上清。(菌液較多時可以通過 多次離心將菌體沉淀收集到一個離心管中)。

2 向留有菌體沉淀的離心管中加入100μl 溶液P1(請先檢查是否加入RNase),使用移液器或渦旋振蕩器徹底懸浮細菌沉淀將菌體充分懸浮。

注意:如果菌體未徹底混勻,質(zhì)粒提取量和純度會偏低。

3 向離心管中加入100 μl 溶液 P2,溫和的上下翻轉(zhuǎn)6-8次使菌體充分裂解,室溫靜置1~ 5 min(時間不宜過長),以免質(zhì)粒DNA受到破壞 。

4 向離心管中加入100 μl 溶液 P3,立即溫和地上下翻轉(zhuǎn)6-8次,充分混勻,此時會出現(xiàn)白色絮狀沉淀。12,000rpm(~13,400×g)離心 5min,小心吸取全部上清,備用。

自動化法提取 -MagET? Smart 16 

1 取出MagET? 質(zhì)粒DNA預分裝試劑板,顛倒混勻數(shù)次使磁珠重懸,輕甩MagET? 質(zhì)粒DNA預分裝試劑板使試劑及磁珠均集中到試劑 板底部。

注:使用前小心撕去鋁箔封口膜,避免MagET? 質(zhì)粒DNA預分裝試劑板振動,防止液體濺出。

2 在MagET? 質(zhì)粒DNA預分裝試劑板的第 2,8列中加入預處理的全部上清液,將MagET? 質(zhì)粒DNA預分裝試劑板置于 MagET? Smart 16的底座上。

注:請在加樣后 1h 內(nèi)上機運行程序。

3 將MagET? 8孔磁棒套插入 MagET? Smart 16磁棒套架卡槽內(nèi)。

4 選擇程序并運行,自動化程序結束后,取下MagET? 8孔磁棒套丟棄,拿出MagET? 質(zhì)粒DNA預分裝試劑板,使用移液器從MagET? 質(zhì)粒DNA預分裝試劑板的第6,12列吸取出產(chǎn)物,即為質(zhì)粒 DNA產(chǎn)物。如不能及時進行下游試驗,質(zhì)粒DNA 樣本可短期保存于 -20℃。

表1.MagETTM Smart 16 程序設定

流程

工作孔位

名稱

時長

幅度

頻率

磁吸時間

轉(zhuǎn)移等待

溫度

加熱時間

1

1

取磁珠

1min

最大

最快

60s

0

-

0

2

2

結合

5min

較大

較快

90s

0

-

0

3

3

洗雜

1min

較大

較快

60s

0

-

0

4

4

洗雜

1min

較大

較快

60s

120s

-

0

5

6

洗脫

5min

較大

較快

90s

0

-

0

6

1

棄磁珠

1min

最大

最快

0

0

-

0