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PCR產物純化試劑盒（離心柱法）

產品介紹 

本試劑盒采用獨特的硅膠膜吸附柱純化酶切、PCR等反應溶液中的DNA片段，最大限度的除去反應體系后多余的酶、dNTPS、無機鹽離子及寡核 苷酸引物、緩沖體系等雜質，回收100bp-10kb DNA片段，回收率可達到80%以上，每個離心吸附柱每次可吸附的DNA量為30μg。也可用作DNA 的濃縮和純化。使用本試劑盒回收的DNA可適用于各種常規操作，包括PCR、測序、連接、轉化、文庫篩選、體外翻譯實驗。

注意事項 

1 使用前檢查各組分是否出現沉淀。若有，請輕輕搖晃混合均勻，或37℃水浴重新溶解。 

2 實驗前使用平衡液處理吸附柱，可以充分激活硅基質膜，提高得率。平衡液處理過的柱子，最好當天使用，放置時間過長會影響效果。 

3 洗滌液II使用前請按標簽提示加入無水乙醇，并混合均勻。

使用流程

柱平衡步驟

向吸附柱 AP30中（吸附柱放入收集管中）加入500 μl平衡液，12,000rpm（~13,400×g）離心1min，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放 回收集管中。（請使用當天處理過的柱子）。

提取步驟

1 PCR反應或酶切反應結束后，將反應液移至干凈的1.5ml離心管中，預估反應液的體積，向其中加入5倍體積的結合液，充分混勻。 

2 將吸附柱 AP30放入收集管中，將上一步混合溶液全部加入吸附柱AP30中，室溫靜置1-2min，使用常規臺式離心機12,000rpm（ ~13,400×g）離心1 min，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱AP30放入收集管中。（吸附柱容積為800 μl，若樣品體積大于800μl，可分批加入） 

3 向吸附柱AP30中加入500 μl 洗滌液 II （請先檢查是否加入無水乙醇），12,000rpm（~13,400×g）離心1min，倒掉收集管中的廢液，將吸 附柱AP30放入收集管中。 

4 重復操作步驟3。

5 將吸附柱AP30放入收集管中，12,000rpm（~13,400×g）離心2min，目的是將吸附柱中殘余的洗滌液 II去除，否則殘留洗滌液II中的乙 醇會影響后續的實驗如酶反應等。 

6 將吸附柱AP30置于一個干凈的離心管中，向吸附柱膜的中間部位懸空滴加50-100 μl洗脫液，室溫放置2min，12,000rpm（~13,400×g） 離心2min，將產物溶液收集到離心管中，如不立即進行下游實驗，于-20℃保存備用。

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