Hoechst 33342 染色液（即用型，10μg/ml）

Hoechst 33342 staining solution (ready-to-use, 10 μg/ml)
 

 溫馨提示：見我司整理的細胞核（Cell Nuclear）熒光探針產品專題。

產品簡介：

Hoechst染料是用于顯微觀察標記DNA的熒光染料，常用于細胞核和線粒體顯像。Hoechst 33258和Hoechst 33342是兩種常用染料，均在350nm激發，461nm處發射藍/青色熒光。Hoechst 33342因含乙基，親脂性更強，能更好透過細胞膜，而Hoechst 33258在某些細胞中滲透性較弱。它們可用于活細胞或固定化細胞，常代替DAPI等核酸染料。此外，Hoechst染料還能檢測樣品DNA含量，通過繪制標準曲線分析。Hoechst 33342常用于細胞凋亡檢測，染色后可通過熒光顯微鏡或流式細胞儀檢測，激發和發射波長分別為350nm和460nm，嵌入雙鏈DNA后釋放強烈藍色熒光。

本品為即用型的Hoechst 33342染色液（10μg/ml），可直接用于固定細胞或組織的核染色，也可直接用于活細胞或組織的核染色。

保存條件：

-20℃避光保存（兩年有效）

使用方法（適用于大多數細胞）： 

一．對于固定的細胞或組織：

1．對于細胞或組織樣品，固定后，適當洗滌去除固定劑。隨后如果需要進行免疫熒光染色，則先進行免疫熒光染色，染色完畢后再按后續步驟進行 Hoechst 33342 染色。如果不需要進行其它染色，則直接進行后續的 Hoechst 33342 染色。

2．對于貼壁細胞或組織切片，可以在蓋玻片上或細胞培養板中原位染色，加入少量 Hoechst 33342 染色液，覆蓋住樣品即可。對于懸浮細胞，至少加入待染色樣品體積3倍的染色液，并混勻。室溫放置 3-5分鐘。

3．吸除Hoechst 33342染色液，用TBST 、PBS 或生理鹽水洗滌2-3次，每次3-5 分鐘。

4．直接在熒光顯微鏡下或封片后熒光顯微鏡下觀察。觀察細胞凋亡時，會看到凋亡細胞的細胞核呈致密濃染，或呈碎塊狀致密濃染。

二．對于活細胞或組織：

1．加入適當量 Hoechst 33342 染色液，必須充分覆蓋待染色的樣品，通常對于6孔板，一個孔需加入1ml 染色液，對于96孔板每一個孔需加入100ul 染色液。

2．在適宜于細胞培養的溫度培養20-30分鐘。棄染色液，用PBS或培養液洗滌2-3次即可進行熒光檢測。

注意事項：

1.      熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡量當天完成檢測。

2.      為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液（Cat No.：NBS0032）。

3.      Hoechst 33342 對人體有一定刺激性，為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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