Gelatin, Type B 明膠（B型）

產品簡介：

明膠（Gelatin）是一種由高平均分子量的水溶性蛋白組成的非勻質混合物，存在于膠原蛋白中。通過對皮膚、肌腱、韌帶和骨頭等組織煮沸后提煉所得。A型明膠（Type A Gelatin）來自酸水解的組織，B型明膠（Type B Gelatin）來自石灰水解的組織。

生物學研究，明膠的應用包括：1）包被細胞培養板以提高細胞的貼壁能力；2）加入PCR反應以穩定Taq DNA聚合酶活性；3）WB、ELISA和IHC實驗中用作封閉劑；4）微生物學研究用作物種分化培養基組成成分之一；5）作為生物兼容性聚合物，明膠能用作運輸載體來釋放生化活性分子，或組織再生學中建立支架。工業領域，明膠的應用包括穩定劑、增稠劑和組織形成劑，用在食品中或橡膠替代品、粘合劑、水泥、平板印刷油墨、塑料、人造絲、照相底片和膠片等的生產制造中。醫藥工業中，明膠可用作助懸劑、包膠劑和藥片粘合劑。獸醫方面明膠可用作血漿擴容劑和止血劑。

本品以牛皮為原料，提煉自石灰水解組織所得，為B型明膠。本品以凍干粉形式提供，CAS NO：9000-70-8，凝膠強度~225 g Bloom，達細胞培養級別。用于細胞包被基質的推薦工作濃度為0.1-0.2 mg/cm²。

Bloom number由凝膠強度測定計（Bloom gelometer）測定，指的是從已知濃度溶液的成膠強度。Bloomnumber越高，凝膠越強。Bloom number與平均分子量成正比。

保存條件: 

室溫密封保存，3年穩定。

產品使用：

一、明膠溶液的制備

1.1 明膠的溶解

根據實驗所需的明膠濃度，稱取適量明膠粉末，加入含雙蒸水或PBS緩沖液的容器內，按照以下兩種方法之一：

1）明膠經10 min浸泡后，用熱水浴加熱（溫度不要超過70℃），攪拌直至完全溶解；

2）明膠經10 min浸泡后用小火加熱（溫度不要超過70℃），并不斷攪拌直至完全溶解；

1.2 明膠的除菌

按照以下兩種方法之一：

1）高壓滅菌：將配好的明膠溶液（常用濃度0.1%~2.0%之間）裝入瓶內，121℃，15 psi，高壓滅菌20min；

2）濾膜除菌：低濃度明膠溶液（如0.1%或0.2%）溶解后可用0.2μm濾膜除菌。但需多準備幾個濾器，因為明膠相對比較難過濾。

1.3 明膠的保存

明膠溶液穩定性比較高，置于4℃保存能長期保持穩定?！咀⒁狻浚簻囟忍岣邥黠@降低明膠強度和粘度，導致性能降低。

二、明膠溶液的包被方法

具體的使用濃度和使用量依據細胞類型和實驗目的而定。

2.1 用組織培養級別的水配制2%（w/v）的明膠溶液；

2.2 121℃，15 psi，高壓滅菌20-30 min；

2.3 按照5-10 μL明膠溶液/cm2（或0.1-0.2 mg/cm2）的比例包被培養皿/板/瓶表面。充分覆蓋包被表面。

2.4 放置37℃培養箱，至少干燥2h。吸掉多余明膠溶液，用培養基或PBS緩沖液清洗一遍，晾干后即可使用。

注意事項：

1.      明膠凍干粉室溫密封保存保持數年穩定。但在空氣中加熱到100°C，會膨脹變軟，解聚產生一種碳質并伴隨吡啶堿類和氨氣的產生。＜35-40°C明膠膨脹且吸收5~10倍體積的水產生凝膠。

2.      明膠溶于甘油和醋酸，在熱水比冷水溶解性強。幾乎不溶于大多數有機溶劑比如醇類、氯仿、二硫化碳、四氯化碳、酯類、苯類、酮類和油。

3.      為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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