0.05%胰酶(含0.02% EDTA,含酚紅)
0.05% Trypsin (with 0.02% EDTA and Phenol Red)
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 包裝規(guī)格 | 價(jià)格 |
NBS4512-100ml | 0.05%胰酶(含0.02% EDTA,含酚紅) | 100ml | 216 |
NBS4512-500ml | 0.05%胰酶(含0.02% EDTA,含酚紅) | 500ml | 624 |
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
胰蛋白酶(Trypsin)是細(xì)胞培養(yǎng)中最經(jīng)典的動(dòng)物源性絲氨酸肽鏈內(nèi)切酶,能特異性識(shí)別并切割蛋白質(zhì)多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基的羧基端肽鍵。在貼壁細(xì)胞傳代過(guò)程中,胰蛋白酶通過(guò)水解細(xì)胞間及細(xì)胞與基質(zhì)間的關(guān)鍵蛋白(如纖連蛋白、層粘連蛋白),高效破壞細(xì)胞連接,實(shí)現(xiàn)單細(xì)胞化,是連續(xù)細(xì)胞培養(yǎng)不可或缺的工具。
EDTA(乙二胺四乙酸)作為鈣鎂離子螯合劑,可協(xié)同增強(qiáng)胰蛋白酶活性:一方面削弱細(xì)胞間黏附分子依賴的鈣離子橋接作用,另一方面抑制胰蛋白酶自溶降解。兩者聯(lián)用能顯著縮短消化時(shí)間(通常2-5分鐘),提高細(xì)胞存活率(>95%),并減少胰酶用量,降低對(duì)細(xì)胞表面抗原的損傷。
本試劑采用無(wú)動(dòng)物源成分胰蛋白酶配制,內(nèi)毒素水平<0.5EU/ml,經(jīng)0.22μm過(guò)濾除菌,可直接用于原代細(xì)胞、干細(xì)胞及工程細(xì)胞系的消化傳代,支持免疫細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、上皮細(xì)胞等多種貼壁細(xì)胞類型,為細(xì)胞治療、抗體生產(chǎn)及組織工程提供安全、高效、溫和的消化解決方案。
保存條件:
-20℃保存(一年有效)
產(chǎn)品使用:
以T25培養(yǎng)瓶為例:
1. 細(xì)胞洗滌:傳代前吸除培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)基,沿側(cè)壁緩慢加入3ml無(wú)菌PBS或DPBS,輕輕晃動(dòng)沖洗細(xì)胞單層以去除殘留血清及死細(xì)胞,吸凈洗滌液。此步驟可顯著降低血清對(duì)胰酶活性的抑制。
2. 消化與中和:加入1ml胰酶,水平搖晃使其均勻覆蓋細(xì)胞層,置于37℃培養(yǎng)箱孵育3–5分鐘。顯微鏡下觀察,待細(xì)胞變圓、間隙增大時(shí),立即用3ml完全培養(yǎng)基(含血清)終止消化并輕柔吹打使細(xì)胞脫落。將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至離心管,300–400×g離心3分鐘,棄上清。
3. 重懸與傳代:用適量新鮮完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞沉淀,根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求調(diào)整細(xì)胞密度,按適當(dāng)比例接種至新培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
1. 消化時(shí)間需根據(jù)細(xì)胞類型優(yōu)化,避免過(guò)度消化影響細(xì)胞活性;全程嚴(yán)格無(wú)菌操作。
2. 開封后需轉(zhuǎn)移至4℃保存,注意避光,并請(qǐng)于1周內(nèi)使用完畢。為避免活性成分降解,不建議反復(fù)凍融。
3. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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本產(chǎn)品僅用于生命科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷及其他用途!